发布时间:2022-07-08 11:40:00
实验证实,将来自睾丸的Sertoli细胞与其他组织来源的细胞进行共培养,能够影响这些细胞的生长、发育和分化。但sertoli细胞表达的特定因子尤其是dhh的诱导作用还未见报道。为此,本博士学位论文拟以Sertoli细胞表达的DHH基因为切入点,深入探讨Sertoli细胞能否促进神经前体细胞分化的可能性。
目的:研究Sertoli细胞对胚胎中脑NPCs的营养和对DA能神经元分化的诱导作用。
方法:将大鼠Sertoli细胞与胚胎进行体外接触13.5天大鼠中脑NPCS培养10天,非接触10天,免疫荧光检测DA能神经元标记物酪氨酸羟化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)的表达。
结果:10天时接触共培养和非接触共培养TH阳性的神经元分别为30.56~7.08,26.45~6.23。而对照npcs单独培养组仅为1.12±0.06。
结论:Sertoli细胞能促进与其共培养的胚胎中脑NPCs向DNA能神经元方向分化。
第二部分:大鼠的DHH基因克隆及其在条件细胞COS7、NIH/3T3、9L、星形胶质细胞和Sertoli细胞和上清中的表达和过表达。
目的:从SD大鼠睾丸组织中克隆DHH基因,构建真核表达载体XSN/DHH;感染条件细胞COS7、NIH/3T3、9L、星形胶质细胞和Sertoli。
细胞,用免疫荧光细胞化学、实-时定量PCR、Westernblot等方法鉴别DHH在上述细胞和上清中的表达和过表达。
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